小動(dòng)物磁共振成像的原理以及在科研中的應(yīng)用
不懂影像學(xué)的人,一看小動(dòng)物MRI的操作界面,就會(huì)被復(fù)雜的參數(shù)設(shè)置,五花八門的掃描順序弄得一頭霧水。事實(shí)上,作為一名操作儀器的研究員,我們并不需要知道掃描順序的原理,也不需要知道相關(guān)參數(shù)罵我們需要知道的是,如何利用小動(dòng)物核磁共振技術(shù)來(lái)評(píng)估我們的實(shí)驗(yàn)對(duì)象,并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析,從而得到一些傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法得不到的有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,從而“錦上添花”。以下將重點(diǎn)闡述在醫(yī)療科學(xué)研究中使用的小動(dòng)物MRI掃描序列及其實(shí)用案例中。
圖1.PharmaScan 70/16 US(Bruker)小動(dòng)物磁共振成像設(shè)備Paravision6.0.1軟件操作界面。
首先要說(shuō)的是結(jié)構(gòu)成像,它主要是反映組織器官的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化,特別適合于組織器官存在占位病變時(shí)的影像分析。結(jié)構(gòu)影像是功能影像學(xué)的基礎(chǔ),因此,在各種動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,都需要對(duì)其進(jìn)行影像學(xué)研究。T2加權(quán)成像是小動(dòng)物MRI中使用最廣泛的一種結(jié)構(gòu)影像,它主要被用在顱腦有關(guān)的疾?。z質(zhì)瘤、腦出血、腦缺血)、腫瘤、肝腎病變、關(guān)節(jié)脊柱病變等動(dòng)物模型中(圖2);其次為T1加權(quán)成像,主要用于肥胖,糖尿病等代謝性疾病模型的評(píng)價(jià)研究。
圖2.小動(dòng)物磁共振T2加權(quán)成像在各類動(dòng)物模型的應(yīng)用實(shí)例。
弛豫是組織的固有屬性,在主磁場(chǎng)強(qiáng)度固定的情況下,組織的弛豫時(shí)間基本保持恒定。利用T1(縱)和T2(橫)弛豫時(shí)間變化,可以在一定程度上反映組織的細(xì)微變化,被廣泛應(yīng)用于多種疾?。ㄈ缋w維化,出血,水腫,炎癥,腫瘤等)的研究。
圖3.T2map(用于測(cè)定T2弛豫時(shí)間)定量分析不同損傷程度小鼠腎臟缺血再灌注恢復(fù)過(guò)程
小動(dòng)物MRI血管成像不需要對(duì)比劑就能獲得模式動(dòng)物的血管形態(tài)學(xué)信息。被廣泛應(yīng)用于顱腦血管性疾病的評(píng)估(圖)。
圖4.小動(dòng)物磁共振血管成像。a.9.4T小動(dòng)物磁共振成像設(shè)備顱內(nèi)血管成像。b.大鼠腦中動(dòng)脈阻塞模型(MCAO)T2加權(quán)成像及血管成像。
擴(kuò)散加權(quán)成像(Diffusion weighted imaging,DWI)與擴(kuò)散張量成像|(Diffusion tensor imaging,DTI)
這兩種方法都是建立在水分子擴(kuò)散理論基礎(chǔ)上的,都能直接地反映生物組織的微結(jié)構(gòu)特征和變化。DWI只使用了一組擴(kuò)散敏感梯度場(chǎng),沒(méi)有將水分子得到分散方向納入其中,因此DWI主要應(yīng)用于急性腦缺血和腫瘤等動(dòng)物模型的研究中,最常見的史表達(dá)分散系數(shù)(Apprarent diffusion coefficient ,ADC),它可以比較簡(jiǎn)單的表征組織內(nèi)的水分子分散情況(圖5)。DTI將擴(kuò)散的方向性引入到生物組織中,并在此基礎(chǔ)上,對(duì)生物組織中水分子擴(kuò)散的方向性進(jìn)行了定量研究。在DTI中,三個(gè)本征向量(V1、V2、V3)和本征值(λ1,λ2,λ3)分別表示了是三個(gè)主要的擴(kuò)散方向,以及它們各自可能的大小。DTI可以在活體無(wú)創(chuàng)狀態(tài)下重建腦白質(zhì)纖維素,在腦白質(zhì)病、脫髓鞘,腫瘤等模型研究中有重要作用(圖6)。
圖5.大鼠腦缺血(MCAO)1小時(shí)T2加權(quán)、DWI圖和ADC圖。腦缺血早期T2圖上未見明顯異常,但DWI和ADC可明顯觀察到異常信號(hào)。
圖6.大鼠DTI掃描FA圖和確定性纖維追蹤。
腦功能成像(Functional MRI,fMRI)
除了結(jié)構(gòu)性影像,其他的影像學(xué)都可以被稱為功能影像學(xué)。腦功能成像是一種基于血氧濃度依賴性(BOLD)的腦功能成像技術(shù),其基本原理是通過(guò)腦內(nèi)血氧飽和度的改變來(lái)反映腦功能狀態(tài)。按其實(shí)施方式可分為兩類:靜息態(tài)(Resting-state fMRI,rs-fMRI)和任務(wù)態(tài)(Task fMRI,tfMRI)。
因?yàn)閯?dòng)物難以完成某些具體的工作,所以在小動(dòng)物中,最常用的方法就是靜息態(tài)的研究。所謂的靜息態(tài),就是在沒(méi)有任何介入的情況下,將動(dòng)物放入核磁共振儀中,對(duì)其進(jìn)行掃描。目前,已有的研究主要集中在靜息態(tài),即低頻段(ALFF)和局部一致性(ReHo)等。另外,基于動(dòng)物靜息態(tài)數(shù)據(jù)我們還可以通過(guò)計(jì)算不同腦區(qū)BOLD信號(hào)的相關(guān)系數(shù)研究大腦功能連接(Functional connection,FC),更深層的基于功能連接的網(wǎng)絡(luò)圖還可進(jìn)行圖論相關(guān)指標(biāo)的分析,如小世界“(small world)屬性、“富人俱樂(lè)部”(rich club)等(圖7)。目前,在阿爾茲海默癥和帕金森病等與學(xué)習(xí)記憶和認(rèn)知功能障礙有關(guān)的動(dòng)物模型中,應(yīng)用最多的小動(dòng)物功能影像學(xué)。
圖7.小動(dòng)物腦功能分析。a.糖尿病大鼠腦ALFF圖[1]。b.動(dòng)物腦功能連接分析流程[2]。
磁共振波譜(Magnetic Resonance Spectroscopy,MRS)
核磁共振(MRI)是目前僅有的一種可活體組織中代謝物進(jìn)行無(wú)創(chuàng)檢測(cè)的方法。一般情況下,由于氫原子處于不同的化學(xué)環(huán)境,其進(jìn)動(dòng)頻率也會(huì)有所差別,從而使MRS譜線產(chǎn)生的化學(xué)位移也會(huì)有所差別,從而可以用來(lái)判定化合物的類型和含量。目前,小動(dòng)物MR波譜主要被用來(lái)探測(cè)腦內(nèi)代謝產(chǎn)物的變化,比如N-乙酰門冬氨酸酯(NAA),膽堿(Cho),肌酸(Cr),乳酸(Lac)等,因而在腦膠質(zhì)瘤, AD, PD,腦缺血等腦內(nèi)代謝產(chǎn)物的變化方面具有非常重要的作用(圖8)。
圖8.小鼠海馬區(qū)MRS檢測(cè)。
灌注加權(quán)成像(Perfusion weighted imaging,PWI)
灌注加權(quán)成像能夠反映血液在組織中流動(dòng)時(shí)的流動(dòng)狀態(tài),并能夠?qū)ρ毫鲃?dòng)過(guò)程中的某些血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行無(wú)創(chuàng)評(píng)估。PWI技術(shù)按有無(wú)外源性造影劑,可分為造影劑首顯像和血管成像兩種。首次通過(guò)法 MR PWI可按造影劑用量、T1/T2弛豫時(shí)間等因素,可分為兩類,一類是動(dòng)態(tài)磁敏增強(qiáng)(DSC-MRI),另一類是動(dòng)態(tài)磁敏增強(qiáng)(DCE-MRI)。
DSC-MRI能反映腦梗死后T_1值的改變,并能反映腦梗死后缺血面積及嚴(yán)重程度。常見的評(píng)估指標(biāo)有:達(dá)峰時(shí)間(topic top tumor temperature, TTP)、平均通過(guò)時(shí)間(method temporal time, MTT)、相對(duì)腦血流(rCBF, rCBV)等;DCE-MRI與T2*值的變化有關(guān),DCE-MRI主要用來(lái)評(píng)估血管的通透性,其相關(guān)的評(píng)估參數(shù)有體積傳遞常數(shù)(Ktrans)、回流速率常數(shù)(Vp)等(圖9)。ASL使用動(dòng)脈血中水質(zhì)子作為內(nèi)源性示蹤劑,不需要注射對(duì)比劑,安全無(wú)創(chuàng),但該方法評(píng)價(jià)參數(shù)較少,只能得到CBF值(每100g組織每分鐘通過(guò)的血流量ml)。
圖9. 小動(dòng)物灌注灌注加權(quán)成像。a. DSC-MRI研究抗血管新生藥貝伐單抗治療大鼠腦膠質(zhì)瘤的治療效果[3]。b. DCE-MRI各項(xiàng)參數(shù)的意義。
灌心臟磁共振成像(Cardiac magnetic resonance imaging , CMRI)
小動(dòng)物心臟磁共振成像是一種可用于評(píng)估心臟結(jié)構(gòu)與功能的無(wú)創(chuàng)影像學(xué)方法。心臟核磁共振影像(MR)是目前臨床上最為常用的一種影像技術(shù)且時(shí)空分辨率高(圖10)。本項(xiàng)目擬在前期研究的基礎(chǔ)上,利用心臟片斷影像技術(shù),對(duì)心臟組織進(jìn)行三維重建,并對(duì)心臟組織進(jìn)行三維重建,并對(duì)心機(jī)組織進(jìn)行三維重建。
圖10. 小鼠心臟電影成像。
以上介紹了小動(dòng)物磁共振在醫(yī)學(xué)科研中常用的掃描序列及一些應(yīng)用實(shí)例,希望對(duì)大家有所幫助。
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