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「質(zhì)粒介紹」分解篇4-蛋白檢測(cè)標(biāo)簽

時(shí)間:2025-05-30 熱度:29



今天為大家講解的是蛋白標(biāo)簽(protein tag)中的蛋白檢測(cè)標(biāo)簽,請(qǐng)往下看哦




在分子生物學(xué)的研究實(shí)踐中,蛋白標(biāo)簽的應(yīng)用非常普遍。這主要是由于在實(shí)驗(yàn)檢測(cè)環(huán)節(jié),研究人員時(shí)常會(huì)遇到目標(biāo)目的蛋白的特異性抗體難以獲得或商業(yè)途徑不易購(gòu)買的情況。為了解決這一關(guān)鍵的檢測(cè)難題,采用對(duì)應(yīng)的蛋白標(biāo)簽便成為一種有效且便捷的策略,能夠順利實(shí)現(xiàn)檢測(cè)目的。目前,被廣泛采納和經(jīng)常使用的蛋白標(biāo)簽主要有以下幾種。

圖片1.png


Flag標(biāo)簽蛋白

8個(gè)氨基酸的親水性多肽編碼的蛋白,同時(shí)載體中構(gòu)建的Kozak序列使得帶有FLAG的融合蛋白在真核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)效率更高。FLAG作為標(biāo)簽蛋白,其融合表達(dá)目的蛋白后具有以下優(yōu)點(diǎn):

FLAG作為融合表達(dá)標(biāo)簽,其通常不會(huì)與目的蛋白相互作用并且通常不會(huì)影響目的蛋白的功能、性質(zhì),這樣就有利用研究人員對(duì)融合蛋白進(jìn)行下游研究。


融合FLAG的目的蛋白,可以直接通過(guò)FLAG進(jìn)行親和層析,此層析為非變性純化,可以純化有活性的融合蛋白,并且純化效率高。


FLAG作為標(biāo)簽蛋白,其可以被抗FLAG的抗體識(shí)別,這樣就方便通過(guò)Western Blot、ELISA等方法對(duì)含有FLAG的融合蛋白進(jìn)行檢測(cè)、鑒定。


融合在N端的FLAG,其可以被腸激酶切除(DDDK),從而得到特異的目的蛋白。因此現(xiàn)FLAG標(biāo)簽已廣泛地應(yīng)用于蛋白表達(dá)、純化、鑒定、功能研究及其蛋白相互作用等相關(guān)領(lǐng)域。

參考圖譜

圖片2.png

HA標(biāo)簽蛋白

源于流感病毒的紅細(xì)胞凝集素表面抗原決定簇,含有高比例的帶電殘基的9個(gè)氨基酸,對(duì)外源靶蛋白的空間結(jié)構(gòu)影響小, 容易構(gòu)建成標(biāo)簽蛋白融合到N端或者C端。易于用Anti-HA抗體檢測(cè)和ELISA檢測(cè)。

參考圖譜

圖片3.png


c-Myc標(biāo)簽蛋白

一個(gè)含11個(gè)氨基酸的小標(biāo)簽,意味著它不太可能干擾(或增強(qiáng))蛋白質(zhì)折疊,可置于蛋白質(zhì)的N端和C端。C-Myc tag已成功應(yīng)用在 Western-blot雜交技術(shù)、免疫沉淀和流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)中, 可用于檢測(cè)重組蛋白質(zhì)在靶細(xì)胞中的表達(dá)。

參考圖譜

風(fēng)險(xiǎn)轉(zhuǎn)移

圖片4.png



V5標(biāo)簽


來(lái)源于副粘病毒SV的P/V蛋白的95-108位氨基酸。


HSV標(biāo)簽(單純皰疹病毒)


來(lái)源于糖蛋白D前體包膜蛋白并且短,所以它不太可能干擾蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)或功能。



記得轉(zhuǎn)發(fā)一下哦!

那么本期推送的蛋白檢測(cè)標(biāo)簽的內(nèi)容就先講到這里,

下一周將發(fā)布

【質(zhì)粒介紹】系列的最后兩篇:

【質(zhì)粒介紹】分解篇5-蛋白熒光標(biāo)簽

【質(zhì)粒介紹】分解篇6-載體推薦

記得關(guān)注噢!



END




重慶宣尊生物科技有限公司成立于2019年10月11日。公司主要經(jīng)營(yíng)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研服務(wù)(病毒包裝,影像檢測(cè)micro-CT,MRI3.0T/7.0T/9.4T,透射電鏡,小動(dòng)物活體成像,光聲成像,散斑血流成像,檢測(cè)分析服務(wù)、藥物靶標(biāo)篩選服務(wù)、細(xì)胞模型構(gòu)建、動(dòng)物模型構(gòu)建以及分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)服務(wù)),代理銷售科研試劑、耗材、轉(zhuǎn)基因鼠及設(shè)備,公司是一家專注于技術(shù)服務(wù)和檢測(cè)技術(shù)的高科技企業(yè),為基礎(chǔ)科研和基因治療臨床前研究提供完善的解決方案,是重慶市高新區(qū)重點(diǎn)支持與打造的高新技術(shù)型企業(yè)。

公司主要經(jīng)營(yíng)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研服務(wù)(檢測(cè)分析服務(wù)、病毒包裝、動(dòng)物模型構(gòu)建、細(xì)胞模型構(gòu)建以及分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)服務(wù)),公司特色項(xiàng)目小動(dòng)物核磁MRI,microCT,nano-CT,PET/CT,3D透明化成像/fMOST成像,OCT,DXA,透射電鏡TEM/掃描電鏡SEM/免疫電鏡,小動(dòng)物活體成像/散斑血液成像/雙光子成像/質(zhì)譜成像,多色熒光/STORM/掃片/代謝籠,電生理,行為學(xué)等,公司是一家專注于技術(shù)服務(wù)和檢測(cè)技術(shù)的高科技企業(yè),為基礎(chǔ)科研和基因治療臨床前研究提供完善的解決方案,是重慶市高新區(qū)重點(diǎn)支持與打造的高新技術(shù)型企業(yè)。
1. 影像檢測(cè)平臺(tái)
小動(dòng)物核磁MRI,microCT,nano-CT,PET/CT,fMOST成像,OCT,DXA,透射電鏡TEM/掃描電鏡SEM/免疫電鏡,小動(dòng)物活體成像/散斑血液成像/質(zhì)譜成像,多色熒光/STORM


2. 透明化成像-雙光子成像平臺(tái)
3D透明化成像:宣尊生物研發(fā)的組織透明三維成像技術(shù)處于國(guó)際領(lǐng)先水平,是目前世界上掌握離體組織器官透明、活體組織器官透明及活體類器官芯片透明術(shù)的雙光子成像:宣尊生物擁有新型雙光子顯微鏡帶有的超高靈敏度的直接探測(cè)器能記錄組織深層最細(xì)微的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。



3. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及病理平臺(tái)
依托重慶腦與智能中心的資源及技術(shù)優(yōu)勢(shì),動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)可裸供動(dòng)物模型構(gòu)建,行為學(xué)測(cè)試、電生理膜片鉗、光遺傳/化學(xué)遺傳、順行/逆行示蹤標(biāo)記、代謝籠等,組織病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)為臨床和基礎(chǔ)科研提供高標(biāo)準(zhǔn)、系統(tǒng)化組織病理學(xué)一站式科研服務(wù)。

 

4.病毒包裝及分子細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)

病毒包裝團(tuán)隊(duì)成員具有十多年病毒包裝技術(shù)經(jīng)驗(yàn),可解決研究人員慢病毒LV,腺相關(guān)病毒AAV,腺病毒ADV等的病毒包裝難題。分子細(xì)胞平臺(tái)可提供細(xì)胞培養(yǎng)。核酸,蛋白提取、純化,鑒定、互作以及生理生化檢測(cè)等常規(guī)檢測(cè):QPCR、WB、ELSA、測(cè)序、化學(xué)靶藥篩及化合物合成。

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