慢病毒

全國(guó)服務(wù)熱線023-86185422 業(yè)務(wù)咨詢17815392366

簡(jiǎn)介

慢病毒載體(lentivirus vector，LV)屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科(Retrovidae)，為 RNA病毒。區(qū)別一般的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，它對(duì)分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力。慢病毒載體的研究發(fā)展得很快，研究的也非常深入。該載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達(dá)到持久性表達(dá)。
感染能力方面可有效地感染神經(jīng)元細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞，從而達(dá)到良好的的基因治療效果，在美國(guó)已經(jīng)開(kāi)展了臨床研究，效果非常理想，因此具有廣闊的應(yīng)用前景。

優(yōu)勢(shì)

慢病毒與其他病毒工具比較，具有以下優(yōu)勢(shì)：
1）表達(dá)時(shí)間長(zhǎng)：慢病毒通過(guò)將外源基因整合到宿主細(xì)胞基因組上，可實(shí)現(xiàn)目的基因長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的表達(dá)，不隨著細(xì)胞分裂傳代而丟失，是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的首選；
2）安全性高：未發(fā)現(xiàn)致病性，已被用于CAR-T 治療作用于人體；
3）免疫原性低：直接注射活體組織不易造成免疫反應(yīng)，適用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。

不同病毒的生物學(xué)特性比較

載體選擇
　　宣尊生物擁有豐富的慢病毒產(chǎn)品，用于操作編碼基因和非編碼基因，如lncRNA、microRNA、circRNA，如下慢病毒載體可供您選擇（不限于此列表）：

調(diào)控方式	載體編號(hào)	載體名稱（載體元件順序）	真核抗性	熒光	啟動(dòng)子	默認(rèn)標(biāo)簽	載體容量
過(guò)表達(dá)	GL127	pSLenti-CMV-EGFP-3xFLAG-WPRE	N/A	EGFP	CMV	3FLAG	4.8kb
	GL121	pSLenti-EF1-EGFP-CMV-MCS-WPRE	N/A	EGFP	CMV	N/A	4.4kb
	GL129	pSLenti-CMV-mCherry-3xFLAG-WPRE	N/A	mCherry	CMV	3FLAG	4.8kb
	GL119	pSLenti-CMV-MCS-3xFLAG-PGK-Puro-WPRE	Puro	N/A	CMV	3FLAG	4.4kb
	GL120	pSLenti-SFH-EGFP-P2A-Puro-CMV-MCS-3xFLAG-WPRE	Puro	EGFP	CMV	3FLAG	3.5kb
	GL107	pSLenti-EF1-EGFP-P2A-Puro-CMV-MCS-3xFLAG-WPRE	Puro	EGFP	CMV	3FLAG	3.7kb
	GL109	pSLenti-EF1-EGFP-F2A-Puro-CMV-MCS-WPRE	Puro	EGFP	CMV	N/A	3.8kb
	GL122	pSLenti-EF1-EGFP-F2A-BSR-CMV-MCS-WPRE	blasticidin	EGFP	CMV	N/A	3.9kb
	GL130	pSLenti-CMV-EGFP-3xFLAG-PGK-Puro-WPRE	Puro	EGFP	CMV	3FLAG	3.7kb
	GL132	pSLenti-EF1-EGFP-F2A-Puro-WPRE2-CMV-MCS	Puro	EGFP	CMV	N/A	3.7kb
	GL123	pSLenti-EF1-mCherry-P2A-Puro-CMV-MCS-3xFLAG-WPRE	Puro	mCherry	CMV	3FLAG	3.7kb
	GL125	pSLenti-CMV-mCherry-3xFLAG-PGK-Puro-WPRE	Puro	mCherry	CMV	3FLAG	3.7kb
	GL133	pSLenti-EF1-mCherry-F2A-Puro-WPRE2-CMV-MCS	Puro	mCherry	CMV	N/A	3.7kb
	H114	pLenti-CMV-Luc2-IRES-Puro-WPRE	Puro	N/A	CMV	N/A	2.2kb
	GL124	pSLenti-EF1-Luc2-F2A-Puro-CMV-MCS-WPRE	Puro	N/A	CMV	N/A	2.8kb
表達(dá)cre	H126	pLenti-CMV-NLS-Cre-3xFLAG-WPRE	N/A	N/A	CMV	3FLAG	3.9kb
表達(dá)cre	H15108	pLenti-CMV-DIO-MCS-WPRE	N/A	N/A	CMV	3FLAG	5.3kb
三標(biāo)	H7656	pLenti-CBh-3xFLAG-Luc2-tCMV-mNeonGreen-F2A-Puro-WPRE	Puro	mNeonGreen	CBh	3FLAG	1.3kb
	H7657	pLenti-CBh-3xFLAG-Luc2-tCMV-tdTomato-F2A-Puro-WPRE	Puro	tdTomato	CBh	3FLAG	0.6kb
	H9911	pLenti-CBh-3xFLAG-Luc2-tCMV-mNeonGreen-F2A-BSR-WPRE	blasticidin	mNeonGreen	CBh	3FLAG	1.5kb
	H9912	pLenti-CBh-3xFLAG-Luc2-tCMV-tdTomato-F2A-BSR-WPRE	blasticidin	tdTomato	CBh	3FLAG	0.8kb
circRNA過(guò)表達(dá)	H8384	pLenti-EF1-EGFP-F2A-Puro-CMV-S-circRNA-WPRE	N/A	EGFP	CMV	N/A	3.0kb
	H8807	pLenti-CMV-S-circRNA-WPRE	N/A	N/A	CMV	N/A	4.8kb
	H8399	pLenti-EF1-EGFP-F2A-Puro-CMV-L-circRNA-WPRE	Puro	EGFP	CMV	N/A	1.0kb
	H8810	pLenti-CMV-L-circRNA-WPRE	N/A	N/A	CMV	N/A	2.8kb
miRNA過(guò)表達(dá)	GL109	pSLenti-EF1-EGFP-F2A-Puro-CMV-MCS-WPRE	Puro	EGFP	CMV	N/A	N/A
	H3919	pCLenti-U6-miR30(miRNA)-CMV-EGFP-F2A-Puro-WPRE	Puro	EGFP	U6	N/A	N/A
	H119	pLenti-CMV-TurboGFP-IRES-Puro-miR30(miRNA)-WPRE	Puro	TurboGFP	CMV	N/A	N/A
	H3928	pCLenti-U6-miR30(miRNA)-CMV-mCherry-F2A-Puro-WPRE	Puro	mCherry	U6	N/A	N/A
	H146	pCLenti-EF1-Puro-CMV-EGFP-3xFLAG-Sponge(miRNA)-WPRE	Puro	EGFP	CMV	3FLAG	N/A
	H7505	pCLenti-U6-TuD(miRNA)-CMV-EGFP-F2A-BSR-WPRE	blasticidin	EGFP	CMV	N/A	N/A
	H7506	pCLenti-U6-TuD(miRNA)-CMV-EGFP-F2A-Puro-WPRE	Puro	EGFP	CMV	N/A	N/A
過(guò)表達(dá)（Tet-on）	H125	pLenti-TRE-EGFP-EF1-rtTA3-IRES-Puro-WPRE	Puro	EGFP	TRE	N/A	2.0kb
	H121	pLenti-TRE-EGFP-3xFLAG-PGK-Puro-WPRE	Puro	EGFP	TRE	3FLAG	3.3kb
	H2057	pLenti-EF1-rtTA3-IRES-Puro-WPRE	Puro	N/A	EF1	N/A	N/A
shRNA干擾	GL401	pCLenti-U6-shRNA-CMV-Puro-WPRE	Puro	N/A	U6	N/A	N/A
	GL404	pCLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-WPRE	N/A	EGFP	U6	N/A	N/A
	GL427	pSLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-F2A-Puro-WPRE	Puro	EGFP	U6	N/A	N/A
	GL428	pSLenti-U6-shRNA-CMV-mCherry-F2A-Puro-WPRE	Puro	mCherry	U6	N/A	N/A
	H7615	pCLenti-U6-shRNA-CMV-mCherry-F2A-BSR-WPRE	blasticidin	mCherry	U7	N/A	N/A
CRISPR敲除	H5070	pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-Puro-P2A-3xFLAG-spCas9-WPRE	Puro	N/A	U6	N/A	N/A
	H7072	pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-BSR-P2A-3xFLAG-spCas9-WPRE	blasticidin	N/A	U6	N/A	N/A
	H6825	pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-sfGFP-P2A-3xFLAG-spCas9-WPRE	N/A	sfGFP	U6	N/A	N/A
	H5068	pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-EGFP-WPRE	N/A	EGFP	U7	N/A	N/A
	H5450	pLenti-CMV-Puro-P2A-3xFLAG-espCas9_1.1-WPRE	Puro	N/A	CMV	3FLAG	N/A
CRISPRa轉(zhuǎn)錄激活	H9517	pCLenti-U6-gRNA-MS2-EFS-dCas9-VP64-T2A-BSD-WPRE	blasticidin	N/A	U6	N/A	N/A
	E2577	pCLenti-EF1a-MCP-P65-HSF1-T2A-Hygro-WPRE	hygromycin	N/A	EF1a	N/A	N/A
	H7284	pCLenti-U6-gRNA-2x(wt+f6)MS2-CMV-MCP-P65-HSF1-IRES-BSR-WPRE	blasticidin	N/A	U6/CMV	N/A	N/A
	H7281	pLenti-CMV-dCas9-VP64-T2A-Puro-WPRE	Puro	N/A	CMV	N/A	N/A

應(yīng)用

1）將目的基因?/RNAi?基因轉(zhuǎn)入難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，比如神經(jīng)元細(xì)胞、干細(xì)胞或其它原代細(xì)胞；
2）將目的基因?/RNAi?基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物組織，以期獲得長(zhǎng)期表達(dá)；
3）構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白?/RNAi?的細(xì)胞系，再用exvivo的方法導(dǎo)入動(dòng)物體內(nèi)；
4）基因治療；
5）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；?
6）基因敲除；
7）藥物研究：構(gòu)建表達(dá)受體蛋白的細(xì)胞系，研究藥物的作用；?
8）快速建立生產(chǎn)目的蛋白的細(xì)胞系，非常有前途的真核細(xì)胞表達(dá)方法。

　　常見(jiàn)MOI列表

細(xì)胞名	中文名稱	慢病毒感染MOI （參考值）
MGC80-3	人胃癌細(xì)胞	10
HT-29	人結(jié)腸癌細(xì)胞	20
RKO	人結(jié)腸腺癌細(xì)胞	10
Caki-1	人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞	10
5637	人膀胱癌細(xì)胞	10
U-118 MG	人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤	10
RWPE-1	人正常前列腺上皮細(xì)胞	20
HeLa	人宮頸癌細(xì)胞	10~20
Ca Ski	人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞	10
MCF7 [MCF-7]	人乳腺癌細(xì)胞	10
A549	人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞	10
NCI-H1299	人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞	20
U-87 MG	人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤	10
U251	人膠質(zhì)瘤細(xì)胞	10
A172	人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞	10
K-562	人慢性髓原白血病細(xì)胞	10
HL-60	人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞	10
GES-1	人胃上皮細(xì)胞	20
U266	人骨髓瘤細(xì)胞	20
CAL 27	人舌鱗癌細(xì)胞	20
PC9	人肺癌細(xì)胞	5
PC14	人肺癌細(xì)胞	10
MADB-106	大鼠乳腺癌細(xì)胞	20
F98	大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞	20
MHCC-97H	人肝癌細(xì)胞（高轉(zhuǎn)移）	10~20

　
　　MOI 是multiplicity of infection 的縮寫，即感染復(fù)數(shù)，其含義是感染時(shí)病毒與細(xì)胞的數(shù)量比值，一般以實(shí)驗(yàn)中某個(gè)細(xì)胞，感染達(dá)到80%，定義為這個(gè)細(xì)胞的MOI值，即病毒量與細(xì)胞數(shù)的比值；加的病毒量(μl)=細(xì)胞數(shù)×MOI/滴度(…/ml) ×1000

慢病毒在腫瘤研究中的應(yīng)用案例

1.Nature Communications. (IF=12.353). Shi Y,et.al. (2017). Tumour-associated macrophages secrete pleiotrophin to promote PTPRZ1 signalling in glioblastoma stem cells for tumour growth.[慢病毒, 膠質(zhì)細(xì)胞瘤]
慢病毒干擾： Lenti-shNT/shPTN/shPTPRZ1

2. Hepatology. (IF=14.079). Ma JZ,et.al. (2016). METTL14 suppresses the metastatic potential of HCC by modulating m6 A-dependent primary miRNA processing. [慢病毒, 肝癌]
慢病毒過(guò)表達(dá)/干擾：pLV-CMV-PGK-EGFP-T2A-puro/ pLV-U6-shRNA-CMV-EGFP-T2A-puro

慢病毒在神經(jīng)系統(tǒng)的應(yīng)用（在體注射）
1．Nature Neuroscience. (IF=19.912). Ding XL,et.al. (2017). Activity-induced histone modifications govern Neurexin-1 mRNA splicing and memory preservation. [慢病毒, 學(xué)習(xí)與記憶](méi)

病毒類型：慢病毒
載體名稱：LV-Suv39h1-RNAi（不確定詳細(xì)的）
注射部位：海馬DG區(qū)
病毒注射量：2 μL，9.98 × 10⁸ TU/mL
檢測(cè)時(shí)間：2周

2．Nature Communications. (IF=12.353). Yao XH,et.al. (2016). Electrical coupling regulates layer 1 interneuron microcircuit formation in the neocortex. [慢病毒, 神經(jīng)環(huán)路]

病毒類型：慢病毒
載體名稱：LV- CX36-shRNA-EGFP（不確定詳細(xì)的）
注射部位：P1小鼠新皮層L1
病毒注射量：1μL
檢測(cè)時(shí)間：2周
3．Molecular Psychiatry. (IF=11.64). Guo DJ,et.al. (2019). Autism-like social deficit generated by Dock4 deficiency is rescued by restoration of Rac1 activity and NMDA receptor function. [慢病毒, 自閉癥]

病毒類型：慢病毒
載體名稱：Lenti-CMV-EGFP-P2A-3FLAG-Rac1
注射部位：小鼠海馬CA1區(qū)
病毒注射量：1μL
檢測(cè)時(shí)間：4周

慢病毒延伸服務(wù)

宣尊生物慢病毒的生產(chǎn)和質(zhì)控采取了國(guó)際學(xué)術(shù)界公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)流程，采用三質(zhì)粒或四質(zhì)粒系統(tǒng)在293T細(xì)胞中進(jìn)行包裝。所獲得的病毒顆粒經(jīng)過(guò)超速離心純化，并通過(guò)qPCR對(duì)病毒基因拷貝進(jìn)行滴定。一般情況下我們的慢病毒的滴度在10⁸~10⁹TU/ml，完全可以滿足各類實(shí)驗(yàn)的使用要求。

上一篇：沒(méi)有了！

下一篇：沒(méi)有了！

返回列表

国产精品熟女高潮视频,无码专区国产精品视频,国产成人毛片在线视频,国产白丝护士AV在线网站

慢病毒

簡(jiǎn)介

優(yōu)勢(shì)

應(yīng)用

人工客服

投訴建議

咨詢熱線